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多肽KLH,BSA,OVA偶聯(lián)服務(wù)
作者:固拓多肽合成公司    發(fā)布于:2020年03月19日
摘要:肽/半抗原必須耦合到載體蛋白(KLH,BSA,OVA),才可以獲得高效的抗體。

/半抗原必須耦合到載體蛋白KLH,BSA,OVA,才可以獲得高效的抗體。一般來說,多肽可以與蛋白偶聯(lián)的條件如下:.半胱氨酸上的-SH是目前最優(yōu)質(zhì)的可用于與載體蛋白偶聯(lián)的基團(tuán)。目前我公司提供高質(zhì)量的偶聯(lián)載體蛋白(KLH,BSA,OVA)。有一個(gè)自由的氨基或羧基,也可以作為偶聯(lián)用化學(xué)基團(tuán),單專一性/選擇性不如巰基

 多肽KLH,BSA,OVA偶聯(lián)服務(wù)

多肽偶聯(lián)簡(jiǎn)介:原則上必須要同時(shí)照顧好載體蛋白/多肽的穩(wěn)定性,不能破壞任何原有化學(xué)結(jié)構(gòu),反應(yīng)條件還要溫和;而且后期基本都是生物學(xué)實(shí)驗(yàn)或動(dòng)物實(shí)驗(yàn),有機(jī)溶劑是存在的越少越好。由于主要參與物為蛋白及多肽等生物制品,而且使用的途徑也是生物途徑,所以必須在溫和的類生物buffer體系進(jìn)行反應(yīng)(PBS,CBS等)。考慮到多肽的復(fù)雜化學(xué)環(huán)境,多基團(tuán),多側(cè)鏈,所以常規(guī)蛋白偶聯(lián)選擇的方法就比較有限,要盡量少的避免各類復(fù)雜的副反應(yīng),反應(yīng)條件還需要溫和。

 

目前常用的三種載體蛋白:KLH 匙孔血藍(lán)蛋白,BSA 牛血清白蛋白,OVA卵清蛋白(雞蛋清脫鹽)。另外還有HAS人血清白蛋白等

。

之所以選擇以上的載體蛋白,是已經(jīng)驗(yàn)證過序列中含有較高比例的賴氨酸且親水性較好,甚至在某些有機(jī)溶劑中都能有較高的溶解及可反應(yīng)性。

 

在遵循以上原則的情況下,常用的三種偶聯(lián)官能團(tuán):Cys-SH巰基,主側(cè)鏈-NH2,主側(cè)鏈-COOH。

 

激活劑:

 

-SH常用MBS/SMCC,或者對(duì)應(yīng)的磺酸化原料。其結(jié)構(gòu)基本都是N-羥基琥珀酰亞胺跟馬來酰亞胺的雙功能結(jié)構(gòu)化合物。

 

我們現(xiàn)在使用的巰基偶聯(lián)激活劑是Sulfo-SMCCsulfo代表磺酸化是一種增加試劑水溶性的手段(不影響偶聯(lián)過程中主要的化學(xué)反應(yīng)),客戶總會(huì)問MBS/SMCC的區(qū)別,如下是各自的結(jié)構(gòu)圖:

               SMCC:                         MBS: arm length 7.3A

             多肽KLH,BSA,OVA偶聯(lián)服務(wù)多肽KLH,BSA,OVA偶聯(lián)服務(wù)

                               Sulfo-SMCC:                                                                                   sulfo-MBS:

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