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常規(guī)多肽的固相合成方式 ，看一遍就能自身合成簡單的肽段
作者：固拓多肽合成公司 發(fā)布于：2020年09月04日
摘要：本文章介紹固相多肽合成最常規(guī)的流程，專業(yè)性偏簡單，作為參照。
本文章介紹固相多肽合成最常規(guī)的流程，專業(yè)性偏簡單，作為參照。
一、樹脂溶脹
稱重取代度為1.0mmol/g的0.6gCTCResin，將樹脂放進(jìn)反應(yīng)管內(nèi)，加DCM(大概15ml/g)，震蕩30min。假如采用的時其他樹脂，一般 會提早將第一個氨基酸與樹脂聯(lián)接好，如Fmoc-Leu-WangResin，溶脹后立即開展第三部脫保護(hù)操作。
二、縮合第一個氨基酸
通過沙芯旋蒸掉溶劑，加入3倍摩爾過多的Fmoc-Leu-OH，加入小量DMF融解，再加入6倍摩爾量的DIPEA，最終加入2.85倍摩爾量縮合實驗試劑HBTU，鼓N20.5h。應(yīng)用DMF洗滌3-4次，去小量樹脂（大概20多個樹脂即可）開展茚三酮檢驗，為無色。
（照片源于一所高校實驗室）
三、脫保護(hù)
加15ml20%哌啶/DMF溶液(15ml/g)，5min，除掉再加15ml20%哌啶DMF溶液(15ml/g)，15min。應(yīng)用DMF洗滌5次，去小量樹脂（大概20多個樹脂即可）開展茚三酮檢驗，為藍(lán)色（或別的顏色）。
四、以此類推重復(fù)第二和第三流程，最終用乙醇洗樹脂3次，并排干。最后獲得流沙狀的樹脂肽，比如：H2N-Gly-Arg(Pbf)-His(Trt)-Ile-Leu-CTCResin。
五、切割
具體操作見多肽切割一文，現(xiàn)有很詳解。
六、補(bǔ)充：
一般采用茚三酮檢驗，加熱溫度為110℃上下，加熱時間為3min。其溶液配制也是有很多種多樣，實驗者能夠多試著一下。
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