肽類化合物普遍存有于大自然中，由α-碳水化合物根據(jù)肽鏈相互連接產(chǎn)生的化學物質(zhì)，另外也是蛋白質(zhì)水解的正中間物質(zhì)。它具備激素調(diào)節(jié)、激素調(diào)節(jié)、酶調(diào)整、抗病毒治療、抗氧化性、降血脂、降低血脂等多種多樣作用，并且做為藥品的前體，應用安全性，身體消化吸收速率比碳水化合物快，因而愈來愈遭受大家的高度重視。現(xiàn)階段，微生物活性肽的科學研究與開發(fā)設計已變成藥業(yè)工程項目等行業(yè)的一個網(wǎng)絡熱點。

       然而基本肽成分低，成份繁雜，尤其是殘渣的理化性質(zhì)與總體目標肽十分類似，分離純化較為艱難。胰蛋白酶水解反應法是常見的，但其物質(zhì)中除活性多肽外，還帶有一部分未水解反應的蛋白、碳水化合物、胰蛋白酶等，要獲得具備目地特異性的活性多肽，還需開展深層次的分離純化。目前的分離出來純化活性多肽的方式關鍵有超濾膜、蛋白質(zhì)變性、疑膠、離子交換法層析、色譜分析和電泳原理等，他們?nèi)窃谔妓衔锖突钚远嚯?、活性多肽和活性多肽、活性多肽和蛋白的基本上?chuàng)建起來的，依據(jù)不一樣的必須在具體運用中常常是幾類方式的融合應用，下邊列舉幾類常見的多肽藥物分離純化的方法：

(1).超濾膜。

       超濾膜是依據(jù)陶氏反滲透膜孔的尺寸和相對分子質(zhì)量的尺寸和樣子來分離出來解決的試品。超濾膜是膜分離設備中最常見的一種分離純化活性多肽的方式，在解決活性多肽試品時，必須將酶解和超濾膜分離出來兩條工藝流程串連在一起，依據(jù)解決試品的特性挑選適合的膜原材料，進而操縱商品相對分子質(zhì)量。超濾膜加工工藝在運作全過程時要耗費很多的水份，因而中后期萃取要消耗時間，并且假如原始料液預處理方式不正確會導致膜孔阻塞，危害膜的使用期，成本費較高。

(2)鹽份功效：

       在水溶液中，濃度較高的的中性鹽能使大分子物質(zhì)集聚在一起產(chǎn)生沉定，這就是蛋白質(zhì)變性全過程。NH2,-OH,-COOH等蛋白以及肽的特點基是吸水性官能團，能與水融合產(chǎn)生凝固層，接著又與蛋白質(zhì)分子結構協(xié)同效應產(chǎn)生吸水性膠體溶液，使蛋白質(zhì)分子彼此之間的力減少，進而提升蛋白和活性多肽的溶解性。將很多的中性鹽添加到蛋白酶解液中，中性鹽能夠 使很多的水分外流，毀壞膜結構工程，使疏水性曝露，正電荷被中合，吸水性膠體溶液被毀壞，進而使蛋白和活性多肽集聚成沉定，獲得目地活性多肽。蛋白質(zhì)變性加工工藝盡管實際操作簡易，成本費較低，但難以避免會提升活性多肽鹽的成分，危害其口味等。

(3)納濾膜：

       納濾膜是一種分離出來特性接近ro反滲透膜與陶氏反滲透膜中間的分離出來方式，納濾膜具備納米的直徑，能截流100~1000D的相對分子質(zhì)量，而小分子多肽與碳水化合物的相對性相對分子質(zhì)量為100~1000D，均為倆性正電荷，分子結構中另外帶有酸堿性和偏堿官能團，當水溶液的pH與pH相同時，分子結構正電荷為中性化，正電荷為零；當pH與pH偏移等電點時，分子結構變?yōu)閹д娀蜇撾姷恼x子，因而運用納濾膜根據(jù)室內(nèi)空間位阻和正電荷效用的協(xié)同功效，可將水溶液中的肽與碳水化合物分離出來。運用納濾膜技術性分離純化活性多肽和碳水化合物主要是以道南效用和室內(nèi)空間位阻效用為基本的，納濾膜的分離出來可選擇性由2個層面決策，在其中Donnan效用受水溶液pH值、電離度、正離子成分及其活性多肽、碳水化合物濃度值和膜表層電荷等要素的危害，在運用納濾膜分離純化活性多肽時要嚴控各種各樣影響因素。當今，運用納濾膜分離出來技術性分離純化碳水化合物和活性多肽的科學研究早已獲得了很多成效，但因為活性多肽與碳水化合物溶液的多元性及其膜產(chǎn)品的單一性，大部分都還沒進到具體運用，大部分還處在試驗室科學研究環(huán)節(jié)。

(4)疑膠過慮層析：

       膠體溶液過慮色譜分析又被稱為分子結構排阻色譜分析、碳分子篩層析等，是運用多孔結構膠體溶液做為固定不動相的膠體溶液填充料，運用活性多肽分子的大小、特性差別等來完成分離出來純化的方式。膠體溶液過慮色譜法的基本原理是依據(jù)成分相對分子質(zhì)量分離出來，當待分離出來成分進到層析柱時，生物大分子成分不可以進到膠體溶液顆粒物內(nèi)，且只有從膠體溶液顆粒物間隙中流動性，流動性速度更快；而小分子水成分能夠 直接進入膠體溶液顆粒物內(nèi)，流動性速度比較慢于膠體溶液顆粒物，流動性遠距離于膠體溶液顆粒物間間隙。因此 ，生物大分子成分最先過柱，小分子水接著過柱，依據(jù)其在離子交換柱中的健身運動速率，做到分離純化的目地。對蛋白、活性多肽、碳水化合物等開展分離純化時，依據(jù)相對分子質(zhì)量的尺寸，挑選分離出來水平充足大的物質(zhì)，挑選適合的疑膠顆粒物。疑膠過慮色譜法已廣泛運用于蛋白、肽類化合物的分離純化，具備實際操作簡單，迅速分離出來等優(yōu)勢。

(5)離子交換法色譜法：

       離子交換法層析是一種運用固定不動相和分離出來后的成分中間的離子交換法來分離出來純化化學物質(zhì)的方式，離子交換劑一般全是固定不動相。依據(jù)環(huán)氧樹脂感應起電性的不一樣，離子交換法層析能夠 分成正離子互換和陽離子互換。進行離子交換法層析時，應留意互換物質(zhì)的挑選、緩存管理體系的挑選及溶液的配制等各個方面的影響因素。目前的離子交換法色譜法因為其可重復性好，實際操作簡易，過柱覆蓋面廣，更合適于工業(yè)生產(chǎn)。

(6)HPLC統(tǒng)計分析方法：

       HPLC法相針對其他的分離出來方式有較高的精準度和優(yōu)勢，HPLC法在分離純化蛋白和活性多肽的全過程中，最常見的是反相HPLC法，它的分離出來基本原理是依據(jù)待分離出來成分在固定不動液中的分派特性的不一樣而完成分離出來，它適用分離出來相對分子質(zhì)量在5000D下列的成分，尤其是相對分子質(zhì)量在1000D下列的小分子活性肽類化合物。HPLC法分離純化活性多肽具備分離出來效果非常的好、檢驗敏感度高、分離純化速度更快等優(yōu)勢，適用高純活性多肽商品的分離純化。

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