用蘇氨酸對接法組裝利拉魯肽的主鏈，用賴氨酸對未保護肽鏈的側(cè)鏈進行修飾，每一步反應(yīng)都具有良好的選擇性。

原修飾后連結(jié)合成利拉魯肽。

利拉魯肽側(cè)鏈修飾反應(yīng)

用Pal-Glu(Osu)-OtBu對Lys的側(cè)鏈氨基進行偶聯(lián)反應(yīng)，得到中間產(chǎn)物，中間產(chǎn)物通過酸處理去除tBu保護基。

因為精氨酸的側(cè)鏈(pKa=12.5)具有很強的堿性，所以控制體系的pH值在10~11之間，使其質(zhì)子化，不與OSu酯反應(yīng)；而序列中的其他堿性基團，如N端氨基(pKa=9.5)，其親核性比Lys20側(cè)鏈氨基(pKa=10.5)低，所以偶聯(lián)反應(yīng)優(yōu)先發(fā)生在Lys側(cè)鏈上。

合成Thr-Gly側(cè)鏈修飾物4：

在水溶性/乙腈(體積比3∶1)溶液中加入3個化合物，加入DIEA調(diào)節(jié)溶液pH10~11。在乙腈中溶解Pal-Glu(OSu)-OtBu，逐個加入上述溶液，滴加完畢，繼續(xù)反應(yīng)30min。冷凍干燥后的白粉經(jīng)半成品HPLC純化(乙腈/水)。

對5對接中間件的合成：

在乙酸/吡啶(摩爾比3∶1)溶液中溶解化合物2和四肽水楊醛酯，室溫下反應(yīng)6h，冷凍干燥除去溶劑，得到粗產(chǎn)物油5，無需精制，直接用于下一步反應(yīng)。

利拉魯肽合成

在TFA/TIS/H2O(體積比95∶2.5∶2.5)混合溶液中溶解化合物5，在室溫下反應(yīng)30毫安；經(jīng)半制取HPLC純化反應(yīng)液(乙腈/水)，凍干白色粉末產(chǎn)物利拉魯肽。

在蘇氨酸對接法合成利拉魯肽方案中，先連接后修飾的合成思路也比較多，另外一種更為高效的合成思路是先連接后修飾，在此不再贅述。

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