一、切記蛋白質(zhì)的儲(chǔ)存標(biāo)準(zhǔn)

超低溫、分裝、濃縮、冷凍／速融、添加劑

二、儲(chǔ)存方法你了解多少

蛋白質(zhì)的的儲(chǔ)存方法的挑選徹底在于蛋白質(zhì)的可靠性以及儲(chǔ)存后何時(shí)再次使用你的蛋白質(zhì)。

1、如即提即用的話，可將濃縮蛋白質(zhì)存儲(chǔ)在單一溶液（如PBS），放置聚丙烯管或整潔的玻璃容器中，放到4°C冰箱儲(chǔ)存。

優(yōu)勢(shì)：蛋白質(zhì)非常容易得到，能夠迅速開(kāi)展試驗(yàn)，且同一管樣品可反復(fù)抽樣，那樣防止了因常常解除凍結(jié)而加快蛋白質(zhì)的溶解。

缺陷：很有可能會(huì)遭遇微生物菌種污染，蛋白質(zhì)失活和氧化，很有可能對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)信息的均一性導(dǎo)致危害。要防止這類狀況，能夠把蛋白質(zhì)分為大份存儲(chǔ)，并添加蛋白酶緩聚劑、抑菌劑和氧化劑等。但也需要依據(jù)自身蛋白質(zhì)的狀況，假如你的蛋白質(zhì)是詳細(xì)的膜蛋白或分泌蛋白,很可能分子結(jié)構(gòu)內(nèi)存有二硫鍵，為確保其一致性，應(yīng)當(dāng)儲(chǔ)存在氧化環(huán)境中。此外，存儲(chǔ)時(shí)間超出一個(gè)月的蛋白質(zhì)能夠考慮到丟掉。

2、分析到適合的緩沖溶液中能夠凍干，放4°儲(chǔ)存；也能加濃度較高的的硫酸銨（你的蛋白質(zhì)不沉積的話），4°儲(chǔ)存。

留意：你需要留意添加硫酸銨后pH會(huì)降低一些，你的緩沖溶液可不可以太貼近蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)啊，蛋白質(zhì)在等電點(diǎn)周邊沉積許多情況下是不能復(fù)溶，即便復(fù)溶活力也不可以確保。

3、提純后的蛋白質(zhì)測(cè)濃度值后，添加50%凡士林，確定攪拌后分裝，液態(tài)氮冷凍，放進(jìn)-20度或-80度儲(chǔ)存，特別是在適用抗氧化物。

優(yōu)勢(shì)：在超低溫下，蛋白質(zhì)對(duì)微生物菌種污染，蛋白酶溶解和氧化還原反應(yīng)更有抵抗能力，非常容易確保其活力。用凡士林或乙二醇稀釋液使蛋白質(zhì)處在溶液中，能夠便捷抽樣。除此之外，這類方法存儲(chǔ)的蛋白質(zhì)能夠儲(chǔ)存長(zhǎng)達(dá)一年，針對(duì)抗體軛合物是一個(gè)好的挑選。

缺陷：蛋白質(zhì)在-20°溶液中仍有可能遭到水解反應(yīng)、污染和氧化，假如蛋白質(zhì)對(duì)氧化性環(huán)境規(guī)定較為高，也需添加緩聚劑、氧化劑等。并且將樣品儲(chǔ)放在50%冷凍保護(hù)膜中有時(shí)候是不可取的，在于你下面要做的試驗(yàn)。

4、有一些蛋白質(zhì)能夠不用凡士林，立即液態(tài)氮冷凍數(shù)分鐘，-80度儲(chǔ)存。

優(yōu)勢(shì)：能夠長(zhǎng)期性儲(chǔ)存（很多年)，不用凡士林、疊氮化鈉等化合物，防止蛋白質(zhì)溶解或微生物菌種污染。

缺陷：冷凍蛋白質(zhì)應(yīng)一次性使用，為了更好地防止不斷凍融循環(huán)產(chǎn)生溶解。除此之外,抗體軛合物(尤其是堿性磷酸酶一氧化氮合酶)冷凍后很有可能會(huì)降解。

5、長(zhǎng)期性儲(chǔ)存蛋白質(zhì)的另一個(gè)方法是凍干（lyophilization）。

優(yōu)勢(shì)：蛋白質(zhì)凍干后會(huì)展現(xiàn)膨松的白色粉末方式，處在徹底脫干的情況，能夠在冰箱中無(wú)期限儲(chǔ)存。

缺陷：針對(duì)一些蛋白質(zhì)，凍干實(shí)際操作有一個(gè)潛在性難題便是蛋白質(zhì)不可以復(fù)溶。凍干／復(fù)溶的全過(guò)程一樣會(huì)對(duì)蛋白質(zhì)造成一定的損害功效。

三、這種關(guān)鍵你需要了解

1、確保穩(wěn)定的pH值，一般PBS更為常見(jiàn)；

2、確保一定的蛋白質(zhì)濃度值，假如濃度值較為稀的話，能夠考慮到加上一定量的BSA；

3、凡士林的加上也可以在非常大水平上提升抗體的可靠性；

4.為了更好地防腐能夠加上一定量的疊氮化鈉（辣根過(guò)氧化物酶偶聯(lián)反應(yīng)的二抗一般不可以加），假如樣品要用以分子生物學(xué)檢驗(yàn)，防止使用添加劑。

5、不論是冷凍或是存儲(chǔ)在溶液中，將蛋白質(zhì)開(kāi)展分裝，以防止凍融循環(huán)，減少污染的風(fēng)險(xiǎn)性。

6、開(kāi)展蛋白質(zhì)實(shí)際操作試驗(yàn)時(shí)一定要帶手套，們的肌膚上面有一些蛋白酶，這種蛋白酶很可能會(huì)溶解掉大家的蛋白質(zhì)樣品。肌膚上的別的化學(xué)分子也很有可能會(huì)污染蛋白質(zhì)樣品。此外，為了更好地避免病菌的生長(zhǎng)發(fā)育，蛋白質(zhì)最好是儲(chǔ)存在殺菌的小管中。

7、防止不斷凍融循環(huán)或凍體力勞動(dòng)融解全過(guò)程，那樣很可能會(huì)減少生物活性。

8、防止震蕩，震蕩造成的剪切力有可能會(huì)對(duì)蛋白質(zhì)造成毀壞功效。震蕩時(shí)溶液中會(huì)造成氣泡，O2的進(jìn)到會(huì)造成蛋白質(zhì)處于氧化環(huán)境中。蛋白質(zhì)中帶有半胱氨酸，其非常容易被氧化為胱氨酸，這一全過(guò)程很可能會(huì)破環(huán)蛋白質(zhì)的活力。

 寫(xiě)到最后：

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