多肽熒光標記，多肽同位素，多肽定制合成，多肽熒光如何標記，多肽熒光標記方法，多肽熒光標記是什么？

異硫氰酸熒光素(FITC)比羧基熒光素活性更高，羧基熒光素在使用前需要激活。FITC主要與巰基反應，如還原型半胱氨酸的側鏈，尤其是多肽或蛋白中的氨基。

對于許多應用來說，在化學合成過程中引入多肽熒光標記是很容易的。例如，在固相合成過程中，FITC可以與賴氨酸(Lys)或選擇性地脫保護的鳥氨酸（ornithine）側鏈，或合成過程中多肽的N端氨基發(fā)生反應。在N端標記時，建議在最后一個氨基與異硫氰酸酯和氨基反應生成的硫脲鍵之間引入烷基間隔器（alkyl spacer），如氨基乙酸(Ahx)。

鏈接切割需要酸性環(huán)境，在N端標記FITC的多肽需要環(huán)化形成熒光素，通常伴隨著最后一個氨基酸的去除。然而，當有間隔劑時，如氨基乙酸，或當目標肽從樹脂通過非酸性環(huán)境切斷時，這是可以避免的。

空間位阻被認為是在熒光染料之前使用Ahx的主要原因，而不是FITC不能直接與多肽偶聯(lián)的原因。Ahx或b-Ala可作為FITC標記多肽的間隔物。

多肽熒光標記技術一般來說，生物素、FITC等染料可以任意標記在多肽的N端或C端上。但是我們推薦N端標記，成功率更高，時間更短，操作更簡單。由于多肽是從C端合成到N端，所以N端修飾是固相合成的最后一步，不需要額外的偶聯(lián)步驟。相反，如果是c端標記，則需要額外的步驟，過程將更加復雜。

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