在多肽生產(chǎn)純化過程中，經(jīng)常遇到難溶的序列，這也導(dǎo)致了許多多肽企業(yè)多肽成產(chǎn)過程中收率低，難純化，成品純度不合格或者多肽生產(chǎn)錯(cuò)誤等結(jié)果，這些難溶性與多肽本身的氨基酸組成及序列有很大關(guān)系，我們在多肽領(lǐng)域里長時(shí)間深入研究，使我們積累了豐富的優(yōu)秀經(jīng)驗(yàn)，確保我們對難溶肽的溶解純化做到較高的通過率和產(chǎn)品質(zhì)量。

我們對難溶肽的溶解梳理出以下內(nèi)容：

(1)一般整體顯酸性的多肽溶解困難時(shí)需要倒入適量的堿性溶液，而顯堿性的多肽溶解困難時(shí)需要倒入適量的酸性溶液;。

(2)序列中含有過多疏水性氨基酸或中性氨基酸時(shí)，不易立即溶于水，一般需要先倒入少許有機(jī)溶劑，溶解充分后用蒸餾水大量稀釋，最常用的有機(jī)溶劑有乙腈，DMSO，DMF，丙醇，異丙醇等;

(3)當(dāng)肽鏈里面含有Met或者Cys時(shí)，不可用DMSO溶解，因?yàn)?/span>DMSO有氧化性，這極可能會(huì)致使肽鏈中所含的S被氧化;

(4)我們在研發(fā)Amyloid系列產(chǎn)品環(huán)節(jié)中，發(fā)現(xiàn)用DMOS溶解的產(chǎn)品純化后所使用的純化柱就幾乎不能用于其他產(chǎn)品的純化，為了確保Amyloid產(chǎn)品的穩(wěn)定，我們對Amyloid等相關(guān)產(chǎn)品均配用了專用的純化柱。

在保證實(shí)驗(yàn)需求的前提下，也可以根據(jù)肽鏈的物理性質(zhì)，化學(xué)性質(zhì)和分子結(jié)構(gòu)，對多肽開展修飾調(diào)整，提高其溶解性，下述是我們建議：

(1)修飾肽鏈中C端和N端：針對酸性肽，特別推薦C端乙酰化修飾;針對堿性肽，特別推薦N端氨基化修飾;

(2)更改肽鏈中的氨基酸序列：一些序列存在許多的連續(xù)的疏水性氨基酸，例如W,F,V,I,L,M,Y,這些疏水氨基酸在序列中大量或者不斷反復(fù)出現(xiàn)時(shí)，整個(gè)肽鏈大多是難溶的，為了提高肽的極性和親水性，一般建議客戶在保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的前提下，延長序列，或通過縮減疏水性氨基酸的數(shù)量來提高溶解性。

(3)替換序列中疏水性氨基酸的殘基：在保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的前提下，用可溶性的氨基酸替代序列中的疏水性氨基酸能夠達(dá)到提升溶解度的作用。我們一般用Gly,Ala來替換疏水性氨基酸，大多都會(huì)獲得比較不錯(cuò)的溶解效果，其實(shí)也是一種保守但有效的加強(qiáng)多肽溶解度的辦法。

寫到最后：

杭州固拓生物科技有限公司定制多肽合成業(yè)務(wù):藥物肽、臨床肽、訂書肽、淀粉肽、醛肽、環(huán)肽、二硫鍵搭橋多肽、穿膜肽、各種抗菌肽、美容肽、磷酸化肽、PEG肽、偶聯(lián)BSA和KLH抗原肽、各類酸修飾多肽、各種胺類化合物修飾多肽(苯胺、異戊胺、二乙胺)、各類榮光標(biāo)記(FITC、FAM系列、DOTA、TAMRA系列、Cy系列)同位素肽等。

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