在生命過程中起著重要的作用，磷酸化位于多肽上的Tyrr、Ser，Thr，。目前磷酸化氨基酸一般用于磷酸肽的生成，目前用于單苯基磷酸化氨基酸。HBTU/磷酸化氨基酸通常用于連接磷酸化氨基酸HOBt/DIEA方法，但目前選擇這種方法生成磷酸多肽也存在缺陷，特別是在生成多磷酸多肽或氨基酸較長的多肽時，連接效率低，最終產(chǎn)品純度低。對于這種磷酸多肽，我們考慮選擇后磷酸化方法。其生成過程是在多肽合成后，選擇性地去除需要標(biāo)記的氨基酸側(cè)鏈保護基。對于Tyr，Thr可以直接使用側(cè)鏈不受保護的氨基酸進行反應(yīng)。-Ser（trt），在1%TFA可定量去除/DCM環(huán)境。

磷酸化后，用雙苯基亞磷酰胺和四氮唑生成亞磷酰胺四唑活性中間體，連接到羥基，然后在過氧酸下氧化形成磷?；?，完成反應(yīng)。

目前，多肽磷酸化修飾方法主要有兩種：

（1）將適度保證的磷酸化氨基酸直接引入多肽序列；

(2)在樹脂上生成多肽序列后，對其進行Ser、Tyr或Thr的側(cè)鏈羥基進行磷酸化。

1)將適度保證的磷酸化氨基酸直接引入多肽序列:

也就是說，需要磷酸化的氨基酸將提前使用（Thr,Ser或Tyr）磷酸化和適當(dāng)?shù)谋Ｗo，然后根據(jù)正常的SPPS生成過程將磷酸化縮小到多肽指數(shù)的選擇點。該方法操作方便，已成為多肽企業(yè)磷酸化修飾的主要方法。

2)在樹脂上生成多肽序列后，對其進行Ser、Tyr或Thr側(cè)鏈羥基磷酸化：

磷酸化裝飾采用磷酸化單一收縮到多肽中的方法時，由于側(cè)鏈裝飾中大基團產(chǎn)生的位阻，磷酸化氨基酸難以與肽鏈收縮，未來氨基酸的引入將更加困難，特別是在含有多個磷酸化位點的裝飾中，生成將變得極其困難，最終產(chǎn)品成分復(fù)雜，難以分離，產(chǎn)量極低。

因此，當(dāng)肽鏈中的多個位點磷酸化時，可以選擇在樹脂上生成多肽序列，然后對其進行Ser、Tyr或Thr的側(cè)鏈羥基磷酸化:其生成過程主要是在多肽合成后有選擇地去除需要識別氨基酸的側(cè)鏈保護基。對于Tyr，Thr可以直接使用側(cè)鏈不受保護的氨基酸進行反應(yīng)。

側(cè)鏈保護基1%TFA/DCM環(huán)境可以定量去除。選擇這種方法時，可以利用雙芐基亞磷酰胺和四氮唑生成亞磷酰胺四唑活性中間體，連接到羥基，然后在過氧酸環(huán)境中氧化形成磷?；?，完成反應(yīng)。

寫到最后:

杭州固拓生物科技有限公司定制多肽合成業(yè)務(wù):藥物肽、臨床肽、訂書肽、淀粉肽、醛肽、環(huán)肽、二硫鍵搭橋多肽、穿膜肽、各種抗菌肽、美容肽、磷酸化肽、PEG肽、偶聯(lián)BSA和KLH抗原肽、各類酸修飾多肽、各種胺類化合物修飾多肽(苯胺、異戊胺、二乙胺)、各類榮光標(biāo)記(FITC、FAM系列、DOTA、TAMRA系列、Cy系列)同位素肽等。固拓生物所有產(chǎn)品僅限科研使用，不得用于人體，如有違反，后果自負。

原創(chuàng)文章如有轉(zhuǎn)載，請注明出處“本文首發(fā)于固拓多肽合成生物科技有限公司(yqp42.net)”