高效液相色譜作為一種高精度儀器，如果在使用中不以正確的方式操作，很容易導(dǎo)致一些棘手的小問(wèn)題。最常見(jiàn)的問(wèn)題之一是柱壓?jiǎn)栴}。如何快速解決故障色譜儀。高效液相色譜儀系統(tǒng)主要由儲(chǔ)液瓶、泵、進(jìn)樣器、柱、柱溫箱、探測(cè)器和數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)組成。對(duì)于整個(gè)系統(tǒng)來(lái)說(shuō)，柱子、泵和探測(cè)器是關(guān)鍵部件，也是容易出現(xiàn)問(wèn)題的主要位置。

柱壓的關(guān)鍵是在使用高效液相色譜時(shí)需要密切關(guān)注的區(qū)域。柱壓的穩(wěn)定性與色譜圖峰形、柱效、分離效果和保留時(shí)間密切相關(guān)。所謂柱壓穩(wěn)定性，并不意味著壓力值穩(wěn)定于穩(wěn)定值，而是意味著壓力波動(dòng)范圍在345kPa或50PSI之間（允許柱壓穩(wěn)定緩慢變化時(shí)使用梯度洗脫）。過(guò)高或過(guò)低的壓力屬于柱壓?jiǎn)栴}。

1、高壓是高效液相使用中最常見(jiàn)的問(wèn)題。這意味著壓力突然上升。一般來(lái)說(shuō)，有以下原因：（1）一般來(lái)說(shuō)，這是由于流道堵塞。此時(shí)，我們應(yīng)該分段進(jìn)行檢查。a.首先，切斷真空泵的入口。此時(shí)，PEEK管充滿(mǎn)液體，使PEEK管小于溶劑瓶，以查看液體是否隨意滴下。如果液體沒(méi)有滴下或緩慢滴下，則溶劑過(guò)濾頭堵塞。處理方法：用30%硝酸浸泡半小時(shí)，用超純水沖洗干凈。如果液體隨意滴下，溶劑過(guò)濾頭正常，正在檢查；b.打開(kāi)Purge閥，使流動(dòng)相不通過(guò)柱子，如果壓力沒(méi)有明顯降低，則過(guò)濾白頭堵塞。處理方法：取出過(guò)濾白頭，用10%異丙醇超聲半小時(shí)。假設(shè)壓力降至100PSI以下，過(guò)濾白頭正常，正在檢查；c.取出色譜柱的出口端，如果壓力不降低，則是柱子堵塞。處理方法：如果是緩沖鹽堵塞，則沖洗95%，直到壓力正常。假使是一些保存較強(qiáng)的物質(zhì)造成阻塞，則應(yīng)使用比現(xiàn)在流動(dòng)相更強(qiáng)的流動(dòng)犯沖向正常壓力。若按上述方法長(zhǎng)期清洗壓力不降低，則可考慮將柱子的進(jìn)出口相反地連接到儀器上，用流動(dòng)相清洗柱子。此時(shí)，如果柱壓仍然沒(méi)有降低，只能更換柱入口篩板，但一旦操作不好，很容易導(dǎo)致柱效降低，所以盡量少用。難以解決的問(wèn)題可以考慮更換色譜柱。

(2)流速設(shè)置不正確：可以重新設(shè)置正確的流量。

（3）流動(dòng)比不正確：不同比例的流動(dòng)比粘度指數(shù)不同，粘度較高的流動(dòng)對(duì)應(yīng)的系統(tǒng)壓力也較大。如果可能的話(huà)，可以更換粘度較低的溶劑或重新設(shè)置和準(zhǔn)備。

(4)系統(tǒng)壓力零點(diǎn)漂移：調(diào)整液位傳感器的零點(diǎn)。

2、壓力過(guò)低（1）通常是由于系統(tǒng)泄漏造成的。處理方法：找到每個(gè)連接處，特別是色譜柱兩端的接口，擰緊泄漏區(qū)域。拆下柱子，用適當(dāng)?shù)牧Q緊或襯里聚四氟乙烯薄膜。

（2）氣體進(jìn)入泵中，但此時(shí)壓力通常不穩(wěn)定，時(shí)高時(shí)低。更嚴(yán)重的是，泵將無(wú)法吸收液體。處理方法：打開(kāi)purge閥，以3~5ml/min的流速清潔。如果沒(méi)有，則使用專(zhuān)用針管在排氣閥處吸出氣泡。

(3)無(wú)流動(dòng)相流出：檢查儲(chǔ)液瓶中是否有流動(dòng)相，沉子是否浸入流動(dòng)相，泵是否運(yùn)轉(zhuǎn)。

(4)參比閥未關(guān)閉：減速后關(guān)閉參比閥。一般降到0.1。～0.2mL/在min之后關(guān)閉參比閥。

總結(jié)：

本文只分析了液相色譜中常見(jiàn)的問(wèn)題。當(dāng)然，在我們的實(shí)際應(yīng)用中，我們會(huì)遇到更多的其他問(wèn)題。在故障處理中，我們應(yīng)該遵循以下原則:一次只改變一個(gè)因素，以確定假設(shè)因素與問(wèn)題的關(guān)系；一般在更換零件進(jìn)行故障排除時(shí)，要注意將拆除的完好零件放回原位，防止浪費(fèi)；養(yǎng)成良好的記錄習(xí)慣是故障處理成功的關(guān)鍵?？傊?，在使用高效液相色譜時(shí)，一定要注意樣品的預(yù)處理和設(shè)備的正確操作和維護(hù)。